Basic Fluorescence Microscopy System - Deep Brain
型号：YH-BFMS-L

系统配置
1. LED连接 / Ce:YAG 光纤光源；
2. 嵌入式荧光显微镜；
3. 荧光显微镜驱动器L型；
4. 嵌入式成像插管L型；
5. 辅助的光纤&电子旋转连接头；
6. 荧光显微镜固定器；
7. 虚拟显微镜；
8. 焦圈调整套；
9. 显微镜控制器软件；
10. 显微镜成像分析软件；

到目前为止我们有S型和L型显微镜，两种型号都有分色光束分离器、M3光纤连接器、CMOS传感器等，每个CMOS序号存储在其电缆，有特定的保护层，校正过滤器可辨认我们的软件包，S型有平行板依赖于模型中的物镜成像插管创建CMOS图像。

下面的视频显示了自由活动小鼠使用Doric荧光显微镜以10帧/秒（fps））的速率在神经元表达的深部脑成像的钙信号GCaMP6，经由Adam Packer, Michael Häusser lab, UCL提供，左边视频显示的是原始数据，右边是使用我们成像分析软件处理后的数据。

图中显示了16个细胞的荧光强度表达GCaMP6在D2受体表达中型棘突神经元的间接途径，这个视频是在自由活动小鼠身上的纹状体(大约4毫米深)采集的，经由 Dr. Akiyo Natsubori (experimenter), and Dr. Kenji Tanaka (PI) from the Department of Neuropsychiatry, School of Medicine, Keio University提供的。

 
产品规格

系统相关组件

荧光显微镜驱动器 （Fluorescence Microscope Driver）

荧光显微镜驱动器允许计算机控制激发LED光源、图像采集和通过高速以太网通信播放单个或多个视频图像，它可以触发或同步外部的记录装置和触发其他设备，这个荧光显微镜驱动器附带有显微镜控制软件。荧光显微镜控制器软件提供接口控制显微镜驱动器，软件确保图像采集和输出16位标记图像文件格式(.tiff)，tiff格式可以容易地与其他所有标准成像软件读取，图像保存是16位像素深度，真正的图像像素深度是10位，所以像素灰度值包含0到1020之间的数。这个分析软件的基本功能是为用户提供便捷，通过嵌入式荧光显微镜采集图像并获取相关的数据，软件以.tiff格式加载图片，然后进行基本的图像处理功能和输出工具以.CVS格式保存荧光数据，这个软件不能代替标准分析工具Matlab、ImageJ或Excel，旨在提供基本的但有用的显微镜图像处理算法。

荧光显微镜控制器界面

成像图像分析界面

1. 功能菜单（Function toolbar）：功能菜单栏是被功能分开的。
输入/输出（I/O）: 包含加载图片和保存图像功能。
ROI管理:包含了绘制、查找单元和清除所有功能，每个ROI手绘或自动查找功能都由ROI管理。
对比度调整（Adjust）: 调整部分包含图像对比度调整功能，这些功能在图像框中临时应用，不保存图像。
处理功能（Processing）：处理部分包含子像素注册的排列图像功能，删除背景照明功能，复位按钮可以重新加载原始图像栈。
路径（Traces）: 包含输出功能，可以输出ROI平均强度数据 .CSV 文件。
2. 图像框（Image box）：在框里可以绘制对个ROIs，ROI是用蓝色突出显示, ROI索引在左上角。
3. ROI 管理（ROI manager）：分两部分，左边是 ROI参数，右边是ROI列表。
ROI参数: 包含ID、图形框里ROI索引显示 、ROI区域像素和坐标。
ROI 情节列表：显示ROI像素值的平均强度，那些轨迹可以通过工具栏里输出按钮输出。

单通道LED连接组件（Connectorized Single LED）

 
组件描述：坚固紧凑的高亮LED模块可接入不同类型的光纤，通过FC接线允许更改或替换的光纤跳线。我们为光纤方法提供了一个最大可能的耦合效率，非常适合LED与多模光纤的耦合，耦合效率取决于LED发射大小、光纤芯直径和光纤的数值孔径，工厂测试的光耦合是1毫米的塑料光纤和200µm直径和0.53 NA玻璃光纤。

嵌入式成像插管 Snap-in Imaging Cannula

嵌入式成像插管和调焦圈

普通光纤套管可以发送光但不创建或获取图像，成像套管可以传输图像，但是在高度混浊介质比如脑组织,只有很短的距离，接近大脑表面附近的区域可以使用S型成像插套管，对于更深层次的大脑区域，则需要使用嵌入式L型成像套管通过影像引导梯度折射率棒透镜来查看内部脑组织，从而将脑成像从大脑内部反应到颅骨表面。这些荧光显微镜焦圈是非常重要的选择，不同深度范围的脑组织使用不同长度的调焦圈，而好的聚焦是从每个套管开始通过调整焦圈完成的，套管是可以被重复使用的。

调焦圈套件 Focus Adjustment Ring Set

 
做为观察要点可以在大脑中任何地方，一套调焦圈用于不同的高度调节，通过结合两种梯度折射率棒透镜和4个调焦圈可以覆盖大部分的脑区，外形尺寸上，调焦环的高度分别是2.05毫米，2.77毫米，3.48毫米和4.2毫米。
下表提供了调焦圈和成像插管结合可达到的穿透深度范围。
Table ：Depth range vs Focus adjustment ring set

虚拟显微镜Dummy Microscope

虚拟显微镜是外观相似、廉价的嵌入式荧光显微镜复制品，可以安装在任何嵌入式成像插管，主要用于实验前期固定啮齿动物头部训练用的，从而最大限度减少在使用真正的荧光显微镜之前的损失，虚拟显微镜有一个M3连接头，可以连接到CM3光纤。

辅助的光纤&电子旋转连接头

光纤&电子旋转接头（fiber-optic&electrical rotary joint）
在光遗传学（optogenetics）实验中通过结合光刺激和电生理记录，可以观察到相关的电脉冲光刺激。在这个阶段，大多数的研究都集中在结合梳状电极与单一的照明光纤或光纤电极。为了促进这种活体实验，光纤&电子旋转接头比整合的电子旋转接头更紧凑，光纤通过电子转接头的中心孔穿过，与FC连接器两端连接进行光通信，光滑有效，这个转接头主要适用于小鼠。